معلومة

2.4: إجراءات المعمل - إعداد الوسائط الصلبة ، وتقنية التعقيم ، وخط T - علم الأحياء

2.4: إجراءات المعمل - إعداد الوسائط الصلبة ، وتقنية التعقيم ، وخط T - علم الأحياء


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

نتائج التعلم

  • لتعريفك بنوعين من وسائل الإعلام الثقافية ، مرق مغذي و الآجار المغذي.
  • لتعريفك بتقنية التعقيم.
  • لتعلم كيفية عزل الثقافة النقية.
  • لمراقبة انتشار وتنوع الكائنات الحية الدقيقة

تقنية العقيم

يتكون الإنسان العادي من حوالي 1013 الخلايا الحيوانية حقيقية النواة و 1014المرتبطة الخلايا الميكروبية حقيقية النواة وبدائية النواة. هذا يعني أن 90٪ من خلاياك ليست بشرية.

الغرض من هذا التمرين هو تعريفك بتقنيات التعقيم. يمكن اعتبار تقنية التعقيم بمثابة التلاعب بالأدوات المعقمة أو وسائط الثقافة بطريقة تحافظ على العقم.

في الطبيعة ، توجد الكائنات الحية الدقيقة دائمًا تقريبًا كمجموعات مختلطة من العديد من الأنواع المختلفة على نطاق واسع. ومع ذلك ، قبل تحديد معظم خصائص وخصائص كائن حي معين ، يجب أولاً عزل الكائن الحي فيه ثقافه نقية. الثقافة النقية هي التي تحتوي على سلالة واحدة من الكائنات الحية الدقيقة. على سبيل المثال ، ثقافة نقية للبكتيريا الإشريكية القولونية يحتوي فقط الإشريكية القولونية خلايا سلالة معينة - لا توجد كائنات دقيقة أخرى. يشير مصطلح سلالة إلى مجموعة من الخلايا تنحدر جميعها من خلية واحدة. يعد عزل الثقافات النقية والحفاظ عليها أحد أهم الإجراءات في علم الأحياء الدقيقة ، والتي يجب أن يكون جميع الطلاب على دراية بها.

مثل جميع الكائنات الحية الأخرى ، تتطلب الكائنات الحية الدقيقة مغذيات وبيئة مواتية للنمو والتكاثر. تزرع الميكروبات بشكل عام في أ وسط الثقافة يحتوي على العناصر الغذائية الأساسية ويوفر بيئة مناسبة (مثل درجة الحموضة المناسبة). تنمو الميكروبات أساسًا في وسط سائل، مرق، أو على وسط صلب ، أجار.

نظرًا لأن معظم الدراسات المختبرية تتم باستخدام مزارع نقية ، فمن الضروري القيام بذلك طهر وسائط الثقافة ، أي القضاء التام على جميع الكائنات الحية. يجب الحفاظ على هذه الوسيلة في معقم حالة خالية من الكائنات الحية ، حتى يتم تلقيحها بثقافة نقية.

لتنمية الثقافة الميكروبية في وسط معقم ، يتم نقل عدد من الخلايا ، اللقاح ، أو تلقيحها ، إلى أو على الوسط مع احتياطات خاصة للحفاظ على نقاء الثقافة. يشار إلى الإجراءات المستخدمة في مختبر علم الأحياء الدقيقة لمنع تلوث الثقافات النقية باسم تقنية العقيم.

القواعد العامة في اتباع تقنية التعقيم هي: 1) عدم وضع أي شيء في مادة معقمة ليست في حد ذاتها عقيمة ، باستثناء الكائن المحدد الذي تدرسه ، و 2) عدم تعريض المواد المعقمة لمصادر التلوث ، على سبيل المثال ، هواء المختبر.

بعد التلقيح ، يتم زراعة الثقافة الميكروبية (محتضن) في بيئة معينة مواتية للنمو. عادة ما يتم تعريف نمو الميكروبات من حيث تعداد السكان نمو، زيادة في عدد الخلايا في السكان ، في مقابل الخلوية نمو، زيادة حجم الخلية الفردية. يظهر النمو الناتج على شكل غيوم أو تعكر أو في وسط سائل أو ككتلة معزولة، مستعمرة، على وسط صلب.

المواد:

الثقافات

الإشريكية القولونية (ثقافة المرق)

السراتية الذابلة

ثقافة مرق مختلطة الإشريكية القولونية و السراتية الذابلة

وسائط

زجاجة واحدة معقمة أجار المغذيات

ثلاث أنابيب مرق مغذيات معقمة

ثلاث لوحات أجار مغذية ، مجففة مسبقًا لمدة يومين في درجة حرارة الغرفة

اللوازم

أربعة أطباق بتري بلاستيكية معقمة

مسحات قطنية معقمة

الغرض من هذا التمرين هو تعريفك بتقنيات التعقيم. تم تصميم جميع الإجراءات لتقليل التلوث. راقب العرض التوضيحي الذي قدمه مدرس المختبر واتبع الإجراءات الموضحة في الدليل بالضبط. ضع البكتريا أمامك وضع جميع الأنابيب والمعدات الأخرى في مكان مناسب يسمح لك بالوصول إليها دون أي صعوبة ودون حرق نفسك.

في البداية ، ستكون هذه الإجراءات الخاصة بمعالجة الحلقة والأنابيب والقبعات صعبة ، ولكن مع الممارسة ستصبح هذه التلاعبات أسرع وأقل تعقيدًا.

تشغيل Bacticinerator:

معقم الجراثيم هو معقم حراري بدون غاز ، عديم اللهب للاستخدام مع حلقات التلقيح والإبر والأنبوب الزجاجي / أفواه الماصة والعديد من الأدوات المعدنية والزجاج البورسليكات. يتم التعقيم من خلال حرارة الأشعة تحت الحمراء. عملية: قم بتشغيل مفتاح التبديل إلى ملف "مكانة عالية؛ سيضيء ضوء المؤشر الأحمر عندما يكون المفتاح في الموضع الصحيح. يجب تسخين المعقم لمدة 15 دقيقة قبل استخدامه. أمسك حلقة التلقيح بالمقبض ، وأدخل حلقة التلقيح برفق لتعقيمها في منطقة التعقيم الأسطوانية (انظر الصورة أدناه). تأكد دائمًا من الاحتفاظ بالعنصر بمادة عازلة. لا تلمس المنتج المعقم مباشرة. لا "توقف" الحلقة هناك غير مقصودة ، ستفعل إنصهار. تجنب كشط جوانب العنصر لضمان طول عمر الحلقة وعنصر السخان. عقد حلقة لمدة 5 ثوان. ليس من الضروري أن تكون الحلقة متوهجة. يمكن أن يصل الدرع المعدني الخارجي لعنصر السخان إلى درجات حرارة تصل إلى 400 درجة فهرنهايت. لا تلمس الدرع المعدني الخارجي أو إدخال أي مواد قابلة للاشتعال أو متطايرة في المنطقة المحيطة بالمعقم.

قم بإيقاف تشغيل أداة البكتيريا بعد الانتهاء من استخدامها في التمارين المعملية لهذا اليوم.

أ. إعداد الوسائط الصلبة

عادة ما يتم صنع الوسط الصلب عن طريق إضافة عامل التصلب إلى وسط مرق. أكثر عوامل التصلب شيوعًا هي مادة الأجار ، وهي مادة يتم الحصول عليها من الطحالب البحرية ومتوفرة في شكل مُنقى مُجفف. على الرغم من اختلاف الآجار اختلافًا كبيرًا في خصائصها الفيزيائية ، فإن نقطة الانصهار المعتادة هي 97-100 درجة مئوية. وبالتالي ، يمكن إضافة أجار صلب إلى وسط الثقافة السائلة ويذوب أثناء التعقيم الحراري. بعد التعقيم ، يمكن سكب هذه الوسائط السائلة في أنابيب الاختبار أو الزجاجات أو أطباق بتري. عند التبريد ، يتجمد هذا الوسط المحتوي على أجار عند حوالي 42 درجة مئوية. بمجرد ترسيخ وسائط أجار ، قد يتم تحضينها على نطاق كامل من درجات الحرارة التي من المحتمل أن يستخدمها عالم البكتيريا (حتى 70 درجة مئوية ، ربما) دون ذوبان.

ان مائل أجار ينتج عندما يُسمح لوسائط الأجار المنصهرة الساخنة بالتصلب في أنبوب اختبار مثبت في وضع مائل. يصنع صب وسط أجار منصهر في أطباق بتري البلاستيكية أو الزجاجية لوحات أجار.

1. ضع أربع لوحات بتري معقمة في الجانب الأيمن أمامك.

يكون الجزء السفلي من صفيحة البتري أصغر وأعمق من الجزء العلوي ، وغالبًا ما يُسمى الغطاء. لذلك ، يكون الجانب الأيمن للأعلى عندما يكون الجزء السفلي ملامسًا للمقعد ويغطي الغطاء الأكبر الجزء السفلي.

2. قم بتشغيل البكتيرية.

3. يجب أن تعمل بسرعة الآن لمنع الأجار من التصلب قبل أن تنتهي من صب الأطباق. قم بإزالة زجاجة من وسط أجار المغذيات الذائب من الحمام المائي 55 درجة مئوية. امسح الماء اللاصق من الزجاجة بحذر حتى لا يصطدم هذا الماء الملوث باللوحة عند قلب الزجاجة.

4. قم بفك غطاء الزجاجة ولكن لا تقم بإزالته. عندما يتم فك الغطاء بالكامل ، قم بإزالته عن طريق تطويق الغطاء بإصبعك الأيمن أو الأيسر والحافة الخارجية لراحة يدك. انظر الشكل 1-1 أ. لا تضع الغطاء لأسفل على سطح المنضدة.

5. بينما لا تزال ممسكًا بالغطاء ، أمسك الزجاجة بإحكام بإبهامك وسبابة يدك اليمنى. انظر الشكل 1. قم بتمرير شفة الزجاجة برفق أمام البكتيرة لحرق أي غبار ملتصق وكذلك لإعداد تيار هواء سالب. ستكون شفة الزجاجة معقمة من إجراء التعقيم بالبخار المضغوط.

6. ارفع غطاء صفيحة بتري بيدك اليسرى أو اليمنى بما يكفي للسماح لك بصب بعض وسط الأجار في قاع لوحة بتري. انظر الشكل 1-1 ب.

7. صب وسطًا كافيًا في قاع لوحة بتري لتغطية السطح السفلي فقط. (يجب أن تكون قادرًا على سكب أربعة أطباق بسهولة وربما خمسة مع 100 مل من المتوسط.)

8. أعد وضع الغطاء لتغطية الجزء السفلي من لوحة بتري.

9. حرك الألواح المصبوبة بحذر وببطء إلى جزء (خلفي) غير مضطرب من سطح المنضدة لتبرد وتتصلب. لا تزعج هذه اللوحات لمدة 20 دقيقة على الأقل.

10. سيتم استخدام هذه اللوحات في الجزء (د) من هذا التمرين.

B. التحويلات المعقمة

بالنسبة لطبيب الأحياء المجهرية ، يعتبر نقل الثقافات من أنبوب إلى أنبوب ومن ألواح أجار إلى أنابيب إجراءً شائعًا وبسيطًا ولكنه يتطلب اهتمامًا دقيقًا بتفاصيل معينة. غالبًا ما يتم نقل الكائنات الحية الدقيقة باستخدام حلقة سلكية. سيساعد الاستخدام السليم لحلقة التلقيح هذه في ضمان الحفاظ على ثقافة نقية.

1. قم بتسمية 3 أنابيب من مرق المغذيات المعقمة. قم بتسمية واحدة "تحكم معقم" ، واحدة "نقل مرق" ، وواحدة "نقل مستعمرة".

2. مزارع مرق الإشريكية القولونية وثقافة لوحة السراتية الذابلة في نهاية مقعدك.

3. عقد الحلقة الخاصة بك مثل قلم رصاص ، أدخل الحلقة في المنطقة الأسطوانية لمولد البكتيريا. تسخين السلك في جهاز التعقيم فقط ، ليس حامل السلك. إذا تم القيام به بشكل صحيح ، فيجب أن يستغرق الأمر 5 ثوانٍ فقط حتى يتم تعقيم طول السلك بالكامل. بمجرد حدوث ذلك ، قم بإزالة الحلقة. سيكون السلك الآن معقمة وساخنة جدا. اترك الحلقة لتبرد في الهواء لعدة ثوانٍ قبل استخدامها. هذا يتجنب قتل الخلايا المراد نقلها وتناثرها الذي يمكن أن يؤدي إلى إنتاج الهباء الجوي الملوث.

3 أ. الآن التقط الأنبوب الذي يحتوي على الثقافة النقية من الإشريكية القولونية بيدك الأخرى ، مع الاستمرار في الضغط على معقم حلقة. باستخدام اليد التي تمسك الحلقة ، قم بإزالة الغطاء من أنبوب الثقافة بتطويقه بإصبعك الصغير والحافة الخارجية لراحة يدك. ارى الشكل ل. لاتفعل ضع الغطاء على مقعدك. قم بتمرير شفة الأنبوب برفق أمام البكتيرة.

4. الآن أدخل الحلقة في ملف بكتريا قولونية ثقافة المرق ثم إزالتها ، وتنفيذ حلقة من الثقافة من الأنبوب. ارى الشكل 2. استبدل غطاء الأنبوب وأعد الأنبوب إلى رف التخزين.

5. التقط وأزل الغطاء من أنبوب مرق المغذيات المعقم المسمى "نقل المرق" بنفس الطريقة الموضحة في الخطوة 3 أ أعلاه.

6. قم بإمالة الأنبوب بزاوية 45 درجة وأدخل الحلقة التي تحتوي على المزرعة في الأنبوب المفتوح. اغمر الحلقة في المرق وقم بتدوير الحلقة برفق ثم قم بإزالتها. مرر الأنبوب أمام البكتيرة وأعد الغطاء وأعد الأنبوب إلى رف التخزين.

7. عقم الحلقة قبل إخمادها بتكرار الخطوة 3. وهذا ضروري لتجنب تلويث المقعد بالثقافة.

8. الآن ، بيدك الأخرى ، ارفع غطاء لوحة بتري التي تحتوي على ثقافة نقية لـ السراتية الذابلة. الحصول على لقاح عن طريق مجرد لمس واحد من المستعمرات المنفردة المعزولة على سطح أجار. لا تحفر في أجار. لا تكشط الحلقة عبر سطح اللوحة. استبدل غطاء اللوحة على الفور.

9. التقط وقم بإزالة الغطاء من أنبوب مرق المغذيات المعقم المسمى "نقل المستعمرة" بنفس الطريقة الموضحة في الخطوة 3 أ أعلاه.

10. كرر الخطوتين 6 و 7.

11. لاختبار قدرتك على تعقيم الحلقة الخاصة بك بشكل صحيح ، اختر حلقة من الثقافة من بكتريا قولونية أنبوب زراعة المرق باتباع الإجراءات الموضحة في الخطوات 3 ، 3 أ ، 4. قم بتعقيم الحلقة التي تحتوي على الثقافة البكتيرية بشكل صحيح ، كما في الخطوة 7.

12. التقط وأزل الغطاء من أنبوب مرق المغذيات المعقم المسمى "تحكم معقم" بنفس الطريقة الموضحة في الخطوة 3 أ أعلاه وأدخل الحلقة في المرق كما هو موضح في الخطوة 6.

13. كرر الخطوتين 11 و 12 عدة مرات باستخدام نفس أنبوب "التحكم المعقم".

ج. لوحات الخط

تقنية لوحة الخط هي طريقة سريعة وبسيطة لعزل البكتيريا عن طريق نشرها ميكانيكيًا على سطح أجار صفيحة بتري. الغرض هو الحصول على مستعمرات معزولة جيدًا ، كل منها ينشأ من بكتيريا واحدة ، بحيث يمكن إنشاء ثقافة نقية لكل نوع مرغوب فيه في خليط. يعد ترتيب الصفائح بالشكل الصحيح مهارة بسيطة نسبيًا ولكنها لا غنى عنها مطلوبة من أي عالم ميكروبيولوجي.

تتضمن الطريقة الأساسية لإعداد لوحة الخط انتشار حلقة مفردة من اللقاح على سطح وسط أجار. هناك العديد من التقنيات المختلفة المستخدمة في تلوين اللوحات. اختيار الأسلوب هو مسألة تفضيل فردي وحكم. يمكن استخدام أي طريقة طالما تم تحقيق الهدف ، إنتاج مستعمرات معزولة جيدًا ، ولا يوجد دليل على وجود تلوث. يُطلق على الإجراء الموضح أدناه بشكل عام اسم "خط T" ، بعد وضع العلامات على الجزء السفلي من اللوحة.

1. ارسم خطًا واحدًا ، تقريبًا ثلث الطريق لأسفل ، عبر الكل قاع من اللوحة. ثم ارسم خطًا ثانيًا من منتصف الأول عبر المركز إلى الجانب الآخر من اللوحة. يجب أن يؤدي هذا إلى إنشاء حرف "T" كبير على طبقك ، وتقسيمه إلى ثلاثة أقسام. انظر الشكل 1-4.

2. قم بتسمية ملف قاع من كل من 3 لوحات أجار المغذيات مع اسمك أو الأحرف الأولى ، قسم المختبر الخاص بك ، والأنواع البكتيرية التي سيتم استخدامها. بالإضافة إلى ذلك ، قم بتسمية واحدة "من مرق" ، وواحدة "من أجار" ، وواحدة "ثقافة مختلطة".

3. استخدم تقنيات التعقيم التي تعلمتها في الجزء ب. عقم الحلقة واتركها لتبرد.

الحصول على لقاح للخلايا البكتيرية من:

• مرق أنبوبي يحتوي على مستنبت نقي الإشريكية القولونية

• طبق أجار السراتية الذابلة

• أنبوب المرق الذي يحتوي على ثقافة مختلطة يزودك بها مدرسك.

عند الحصول على عينات من المستعمرات التي تنمو على ألواح أجار ، يكون الأمر كذلك فقط ضروري وينصح بأن الحلقة فقط لمس السطح من واحد مستعمرة.

عند الحصول على عينات من مرق الثقافات ، تأكد من ذلك مزج المحتويات لضمان التوزيع المتساوي للكائنات الحية الدقيقة.

4. تلقيح سطح ألواح الأجار باستخدام النمط الموضح في الشكل 1-5 والتقنية الموضحة أدناه.

أ) قم بإيداع اللقاح عن طريق لمس الحلقة لسطح اللوحة القريب
الحافة ، في القطاع العلوي من اللوحة. ارسم الحلقة بخفة عبر ال
سطح أجار 2 سم ، من الحافة نحو المركز.

يمكن التعامل مع اللوحة بعدة طرق ، وكلها تحاول تقليل التلوث المحتمل. سيشرح لك مدرس المختبر أسلوبًا أو أكثر من الأساليب الممكنة. بالنسبة لكل ما يلي ، لا تحافظ على سطح أجار للوحة مكشوفًا دون داع ، فقط قم بتعريض السطح أثناء عملية الحز.

• تظل اللوحة على الجانب الأيمن لأعلى على المقعد ، ويتم رفع الغطاء ولكن يتم الاحتفاظ به فوق اللوحة أثناء وضع الخطوط. انظر الشكل L-6a.

• اللوحة مقلوبة وبينما يبقى الغطاء على المقعد ، يتم رفع الجزء السفلي ويتم رسم سطح الأجار من الأسفل. انظر الشكل L-6b.

ثم عقم الحلقة واتركها تبرد في الهواء لبضع ثوان. المس الحلقة بحافة غير مستخدمة (منطقة معقمة) من سطح أجار لتبريدها تمامًا قبل المتابعة.

ب) بداية من حافة اللوحة بالقرب من إيداع اللقاح الأولي ، قم بعمل
عدة خطوط متوازية (10-20) تمر عبر اللقاح الأصلي
الوديعة. قم بتغطية ثلث اللوحة ، بدءًا من الحافة والتحرك
باتجاه وسط اللوحة. قم بذلك عن طريق تأرجح حامل الحلقة للخلف
وعلى سطح الأجار بضغط لطيف للغاية ومتساوٍ ،
استخدام فقط حركة الرسغ. يجب أن تعيد الحلقة مسارها تقريبًا مع
كل تأرجح وهو يتحرك لأسفل سطح أجار من الحافة نحو
مركز اللوحة. حاول الاحتفاظ بالحلقة والسلك وحامل الحلقة في الطائرة
بالتوازي مع سطح أجار طوال الخط. حاول ألا ترفع
حلقة من أجار. حاول أن تبقي الحلقة على اتصال مع السطح من
بداية الخط حتى النهاية. لا تحفر الحلقة في أجار
واسطة،

* عقم الحلقة واتركها تبرد كما هو موضح أعلاه.

ج) قم بتدوير اللوحة 90 درجة.

اسحب الحلقة خلال إحدى الحواف من الخطوط السابقة مرتين أو ثلاث مرات لإعادة تلقيح الحلقة. الآن قم بتخطيط الثلث الثاني من اللوحة بعدة خطوط متوازية أخرى (10-20) مرة أخرى بدءًا من الحافة وتتحرك باتجاه مركز اللوحة. بعد إعادة التطعيم الأولي ، تجنب لمس الثلث الأول المخطّط بالفعل من اللوحة.

* عقم الحلقة واتركها تبرد كما هو موضح أعلاه.

د) قم بتدوير اللوحة 90 درجة.

اسحب الحلقة عبر إحدى الحواف في الثلث الثاني من اللوحة لإعادة تلقيح الحلقة. الآن قم بتخطيط الثلث الأخير من اللوحة على النحو الوارد أعلاه ، مع توخي الحذر تجنب الثلثين الأول والثاني من اللوحة.

* تعقيم الحلقة بعد آخر خط.

د. وجود الكائنات الحية الدقيقة في كل مكان

الكائنات الحية الدقيقة في كل مكان. المختبر مليء بالعديد من أنواع الميكروبات المختلفة ، في الهواء وعلى المقاعد وعلى الأرض وعلى ملابسك وجسمك. هذا الوجود الكلي للكائنات الدقيقة هو أحد أسباب تعلمك لتقنيات التعقيم الجيدة في الأجزاء A و B و C من هذا التمرين. تم تصميم هذا الجزء من التمرين لإعطائك فكرة عن نوع وأعداد الميكروبات الموجودة في المختبر. هناك أيضًا بعض الحرية للسماح لك بإرضاء فضولك حول الكائنات الحية الدقيقة من حولك. أخيرًا ، سيُطلب منك عزل أحد الأنواع البكتيرية التي تحصل عليها من هذا التمرين لاستخدامها في التمرينين التاليين.

1. تحقق للتأكد من تصلب الأجار في اللوحات الخاصة بك من الجزء أ عن طريق إمالة الألواح بعناية والبحث عن الحركة. إذا كان الأجار صلبًا ، يمكنك العمل مع الألواح. قم بتسمية لوحة واحدة في الجزء السفلي بأنها "تحكم معقم". لا تفتح هذه اللوحة في أي وقت. يستخدم هذا للتحقق مما إذا كانت لديك تقنية تعقيم جيدة عند سكب الأطباق الخاصة بك.

2. استخدم لوحة واحدة لاختبار التلوث الطبيعي للسلع في بيئتك. قم بتسمية "لوحة الاختبار" الخاصة بك وبواسطة المصدر "الإصبع ، الهاتف الخلوي ، إلخ." تشمل التجارب المقترحة ما يلي: فرك أصابعك (بدون قفازات) على سطح أجار للوحة ، أطلق على هذا اسم "لوحة الاختبار ، الإصبع" ، أو فتح لوحة في الهواء لمدة 15-20 دقيقة ، أو السعال في طبق ، أو مسح سطح الأجار برفق بأداة من جيبك أو حقيبة الظهر. من الممكن أيضًا أخذ عينة من السطح ، مثل سطح المقعد أو الأرضية أو الحوض أو الملابس أو الجلد. إذا كنت ترغب في القيام بذلك ، امسح السطح بقطعة قطن معقمة ثم خط بأكمله سطح أجار للوحة مع المسحة. استخدم لمسة خفيفة. يتم تغليف المسحات بشكل فردي وتكون معقمة حتى تلوثها بشيء من اختيارك. تأكد من أن طرف الماسحة القطني لا يتلامس مع أي شيء آخر غير السطح الذي تختبره. تعمل المسحة الرطبة بشكل أفضل في جمع العينات من سطح جاف. يمكنك ترطيب مسحة على سطح صفيحة أجار المغذيات (عند الزاوية) ، ثم أخذ عينة من المنطقة محل الاهتمام.

3. اترك الطبقين المتبقيين بدون ملصق وغير مفتوحين على المقعد ، فهذه لوحات إضافية ل TA لتجميعها واستخدامها للفصل التالي.

4. تذكر تسمية الجزء السفلي من لوحة العينة الخاصة بك. قم بتضمين اسمك أو الأحرف الأولى من اسمك ، وقسم المختبر الخاص بك ، والتاريخ ، ونوع الوسائط (NA لأجار المغذيات) وما تم أخذ عينات منه (المصدر).

E. حضانة

لكي تنمو الكائنات الحية الدقيقة ، فإنها تحتاج إلى بيئة مناسبة. تعتبر درجة الحرارة من أهم العوامل البيئية التي تؤثر على نمو الكائنات الحية الدقيقة. سيتم مناقشة هذا في محاضرة وهو جزء من تمرين لاحق. بالنسبة لمعظم الكائنات الحية المستخدمة في هذا المختبر ،

30 درجة مئوية درجة حرارة مقبولة للنمو. يتم الحفاظ على درجات حرارة النمو المستمر من خلال احتضان الثقافات الميكروبية في غرف يتم التحكم فيها بالحرارة أو أفران صغيرة تسمى الحاضنات.

1. احتضان جميع الأنابيب من الجزء B في حاضنة 30 درجة مئوية. تأكد وضع العلامات الخاصة بك الأنابيب واضحة وكاملة. ضع الأنابيب في الرفوف التي يوفرها لك معلمك.

2. احتضان جميع اللوحات من الجزأين C و D في حاضنة 30 درجة مئوية. تأكد وضع العلامات من لوحاتك واضحة وكاملة.

بسبب التركيز العالي للماء في وسط أجار ، يتشكل بعض تكثيف الماء في أطباق بتري أثناء الحضانة. إذا تم تحضين الألواح في الجانب الأيمن لأعلى ، فمن المحتمل أن تتساقط الرطوبة من الغطاء إلى سطح الأجار وتنتشر. هذا من شأنه أن يعطل تكوين مستعمرة فردية ويؤدي إلى كتلة متكدسة من النمو. لتجنب هذا, لوحات بتري بشكل روتيني (الجانب السفلي في الأعلى) أثناء الحضانة.

F. المراقبة

الملاحظات التفصيلية هي المفتاح لإجراء وفهم وتصميم التجارب العلمية. ستساعدك النظرة الثاقبة والاهتمام بالاختلافات الدقيقة على إكمال أوراق تقارير المختبر بنجاح. بعد الحضانة ، يجب ملاحظة الصفائح والأنابيب بحثًا عن دليل على نمو الميكروبات. سجل ملاحظاتك على صحائف التقرير المقدمة. هذه ليست سوى دليل ، فلا تتردد في تعديلها أو الإضافة إليها ، حسب ما تراه ضروريًا. تذكر أن أوراق التقارير هذه تشكل دفتر ملاحظات المختبر الخاص بك وهي أساس الدرجات والتقييمات المعملية. يجب تحديثها وإحضارها إلى المختبر في جميع الأوقات.

لا تتجاهل عيناتك حتى تكون متأكدًا منها النتائج وهل هناك حاجة لبعض العينات في المرحلة التالية ممارسه الرياضه.

شاهد الفيديو 1: تقنيات التعقيم تلقيح مرق وأنابيب مائلة وطعنات

شاهد الفيديو 1: تقنيات التعقيم تلقيح المرق والأنابيب المائلة والطعنات. عنوان URL: https://youtu.be/nMoM8Ku5-8A

شاهد الفيديو 2: كيفية عمل خط T للمستعمرات المعزولة.

شاهد الفيديو 2: كيفية إجراء خط T للمستعمرات المعزولة. تم تصوير هذا الفيديو في مختبرات الأحياء الدقيقة في ولاية نورث كارولاينا. URL: https: //youtu.be/NsQv7QOmdXo


خط (علم الأحياء الدقيقة)

في علم الأحياء الدقيقة ، تسليط الضوء هي تقنية تستخدم لعزل سلالة نقية من نوع واحد من الكائنات الحية الدقيقة ، غالبًا البكتيريا. يمكن بعد ذلك أخذ العينات من المستعمرات الناتجة ويمكن زراعة ثقافة ميكروبيولوجية على صفيحة جديدة بحيث يمكن التعرف على الكائن الحي أو دراسته أو اختباره.

تطورت طريقة لوحة الخطوط الحديثة من جهود روبرت كوخ وعلماء الأحياء الدقيقة الآخرين للحصول على ثقافات ميكروبيولوجية للبكتيريا من أجل دراستها. تم تطوير طريقة التخفيف أو العزل عن طريق الخطوط لأول مرة بواسطة Loeffler و Gaffky في مختبر Koch ، والتي تتضمن تخفيف البكتيريا عن طريق وضع خطوط منتظمة عليها على السطح الخارجي للأجار في طبق بتري للحصول على مستعمرات معزولة والتي ستنمو بعد ذلك إلى كمية من الخلايا أو مستعمرات منعزلة. إذا كان سطح الآجار ينمو كائنات دقيقة متشابهة وراثيًا ، فإن المزرعة تعتبر ثقافة ميكروبيولوجية.


شاهد الفيديو: نظرة عامه على عملية نقل جزيئات البكتيروفيج للمادة الوراثيه الفيروسية و البكتيرية (قد 2022).


تعليقات:

  1. Kaylyn

    قطعة جيدة جدا

  2. Shakarisar

    انت مخطئ. دعنا نناقش. أرسل لي بريدًا إلكترونيًا إلى PM ، سنتحدث.

  3. Shagis

    أعتقد أنك مخطئ. دعونا نناقش هذا. أرسل لي بريدًا إلكترونيًا إلى PM ، سنتحدث.

  4. Goltigrel

    هذا ضروري. موضوع جيد ، سأشارك. معا نستطيع أن نتوصل إلى الإجابة الصحيحة.

  5. Thu

    إنه لأمر مؤسف ، أنني الآن لا أستطيع التعبير - لا يوجد وقت فراغ. سأعود - سأعبر بالضرورة عن رأيي.

  6. Gaynor

    أعتذر ، لكن في رأيي ، ترتكب خطأ. يمكنني إثبات ذلك. اكتب لي في رئيس الوزراء ، سنناقش.

  7. Kazralkis

    أدعوكم إلى مناقشة.اكتب هنا أو في PM.



اكتب رسالة