معلومة

هل يمكن للأجسام المضادة المتعددة أن تربط نفس المستضد؟

هل يمكن للأجسام المضادة المتعددة أن تربط نفس المستضد؟


We are searching data for your request:

Forums and discussions:
Manuals and reference books:
Data from registers:
Wait the end of the search in all databases.
Upon completion, a link will appear to access the found materials.

نظرًا لاختلاف الحجم بين مولدات الضد الجزيئية الصغيرة والأجسام المضادة ، فهل من الممكن أبدًا أن ترتبط الأجسام المضادة المتعددة بنفس المستضد إذا تعرفت على المجالات المختلفة على هذا المستضد؟ عندما يكون المستضد بروتينًا وليس جزيءًا صغيرًا ، فهل من المرجح أن تترابط أجسام مضادة متعددة؟


ليس من الممكن فقط للأجسام المضادة المتعددة أن ترتبط بمستضد واحد ، عندما يحدث ذلك ، فمن المرجح أن تؤدي إلى استجابة مناعية كاملة.

فيما يلي وصف للمفهوم من شركة تبيع الأجسام المضادة للبحث. للمساعدة في فهم الاقتباس ، ستحتاج إلى معرفة أن الجزء من المستضد الذي يرتبط به الجسم المضاد يسمى الحاتمة.

نظرًا لأن المستضد يمكن أن يحتوي على عدة حواتم مختلفة ، يمكن أن يرتبط عدد من الأجسام المضادة بالبروتين. عندما يكون موقعان أو أكثر من مواقع ربط مولد الضد متطابقين ، يمكن للجسم المضاد تكوين رابطة أقوى مع مولد الضد مما لو كان واحدًا فقط من مواقع الجسم المضاد مرتبطًا. تسمى المستضدات ذات مواقع الارتباط المتعددة المتطابقة متعددة التكافؤ ، وتكون الأجسام المضادة قادرة على ربطها بقوة أكبر.

فيما يلي مقال يصف ، من بين أشياء أخرى ، أهمية التجميع في الخلايا البائية عندما ترتبط مستقبلات الخلايا البائية المتعددة بمستضد واحد متعدد التكافؤ.


التلوين المناعي الثلاثي مع الأجسام المضادة التي أثيرت في نفس النوع لدراسة نمط التعصيب المعقد للمستقبلات الكيميائية داخل الرئة

تتمثل إحدى المشكلات العامة في كيمياء الخلايا المناعية في تطوير طريقة موثوقة متعددة لوسم المناعة عندما يجب استخدام الأجسام المضادة الأولية التي تنشأ في نفس النوع. لقد طورنا بروتوكولًا للكشف المناعي لثلاثة مستضدات في تحضير نسيج واحد ، باستخدام أجسام مضادة أولية غير مقترنة تربى في نفس النوع. أظهر الكشف الكيميائي الخلوي المناعي عن سينثاس أكسيد النيتريك العصبي ، والببتيد المرتبط بجين الكالسيتونين ، وكالبيندين D28k في رئة الفئران أن جزءًا من الأجسام الظهارية العصبية الرئوية يتم الاتصال به بشكل انتقائي من قبل ثلاثة مجموعات مختلفة على الأقل من الألياف العصبية. تم اكتشاف أول مستضد باستخدام تضخيم إشارة التيراميد ، وهي طريقة حساسة للغاية تسمح بتخفيف أول جسم مضاد أولي بعيدًا عن حد الكشف عن الأجسام المضادة الثانوية ذات العلامات الفلورية. تم تصور المستضد الثاني بواسطة جسم مضاد ثانوي أحادي التكافؤ مترافق مع فلوروفور والذي يمنع في نفس الوقت وصول الجسم المضاد الثانوي الثالث إلى الجسم المضاد الأولي الثاني. علاوة على ذلك ، فإن التكافؤ الأحادي لجزء Fab يمنع الجسم المضاد الأساسي الثالث من الارتباط بالجسم المضاد الثانوي من الخطوة الثانية. تقنية التلوين الثلاثي الموصوفة هنا قابلة للتطبيق بشكل عام ، وتستخدم المنتجات المتاحة تجاريًا فقط ، وتسمح باكتشاف ثلاثة مولدات ضد في نفس المستحضر مع الأجسام المضادة الأولية التي تربى في نفس النوع.


الفحص المتعدد للقياس المتزامن للأجسام المضادة لمستضدات المتصورة المنجلية المتعددة

يتم قياس الأجسام المضادة لـ Plasmodium falciparum بشكل كلاسيكي باستخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA). على الرغم من أن هذه التقنية حساسة للغاية ، إلا أنها تتطلب عمالة مكثفة عندما يجب فحص أعداد كبيرة من العينات ضد مستضدات متعددة. قد تكون تقنية مجموعة التعليق (SAT) بديلاً لـ ELISA ، لأنها تسمح بقياس الأجسام المضادة ضد مستضدات متعددة في وقت واحد مع حجم صغير من العينة. سعت هذه الدراسة إلى تكييف نظام SAT متعدد الإرسال الجديد لقياس الأجسام المضادة ضد تسعة مستضدات مرشحة للقاح الملاريا ، بما في ذلك البروتينات المؤتلفة من نوعين مختلفين من بروتين سطح الميروزويت 1 ، نوعان مختلفان من مستضد ميروزويت قمي 1 ، مستضد ربط كريات الدم الحمراء 175 ، بروتين سطح مرزويت 3 ، والببتيدات من بروتين السيرومسبوروزويت ، ومستضد سطح كريات الدم الحمراء الحلقية ، ومستضد مرحلة الكبد 1. تم ربط تركيزات مختلفة من المستضدات بالكريات المجهرية ذات العناوين الطيفية المختلفة ، وتم فحص عينات البلازما من البالغين الكاميرونيين بواسطة SAT في أشكال أحادية ومتعددة و بواسطة ELISA. كانت الكميات المثلى من البروتين المطلوبة لإجراء اختبار SAT أقل بمقدار 10 إلى 100 ضعف من تلك المطلوبة لـ ELISA. تم العثور على توافق ممتاز بين التنسيقين الفردي ومتعدد الإرسال (R & gt أو = 0.96) ، حتى عند استخدام متغيرين من نفس المستضد. كان اختبار الإرسال المتعدد سريعًا وقابلًا للتكرار ويتطلب أقل من 1 مول من البلازما وكان له علاقة جيدة بـ ELISA. وبالتالي ، يوفر SAT أداة جديدة مهمة لدراسة الاستجابة المناعية للملاريا بسرعة وكفاءة في أعداد كبيرة من السكان ، حتى عندما تكون كمية البلازما المتاحة محدودة ، على سبيل المثال ، في دراسات الولدان أو دم وخز الإصبع.

الأرقام

تحديد المقدار الأمثل من ...

تحديد الكمية المثلى للمستضد لمزاوجة الكرات المجهرية. كميات مختلفة من ...

مقارنة MFI بين monoplex ...

مقارنة MFI بين مقايسات monoplex ومتعدد الإرسال وقابلية استنساخ المقايسة. الكرات المجهرية ، مقترنة ...

العلاقة بين النتائج من ...

العلاقة بين نتائج ELISA وتعدد الإرسال SAT. ما مجموعه 50 ...


اعتبارات اختيار الجسم المضاد الأولية لتحليل اللطخة الغربية

الأجسام المضادة متعددة النسيلة مقابل الأجسام المضادة أحادية النسيلة مقابل الأجسام المضادة المؤتلفة

متعدد النسيلةوحيدة النسيلةالمؤتلف
تعريفمجموعة من الأجسام المضادة من الخلايا البائية المختلفة التي تعرفت على حواتم متعددة على نفس المستضدينتج الجسم المضاد الفردي عن طريق استنساخ الخلايا البائية المتطابقة التي تتعرف على حاتمة واحدة على نفس المستضدجسم مضاد منفرد مشتق من DNA المؤتلف. يمكن تعديله على مستوى الحمض النووي أو استخدامه لتوليد مجموعة محددة من الأجسام المضادة.
مزاياحساس للغاية. يمكن للعديد من الأجسام المضادة في البركة متعددة النسيلة أن تربط الحواتم على هدف الجسم المضادتناسق الكثير إلى الكثير. غالبًا ما تتميز بمعرفة تاريخية جيدة لنسخ معينة ، ومنشورات للأداء في النشاف الغربي.إمدادات مستقرة وطويلة الأجل مع تناسق الكثير إلى الكثير. ليس عرضة لانجراف الخط الخلوي.
سلبياتيمكن أن يؤدي التباين في مجموعة الأجسام المضادة إلى الكثير إلى الكثير في الكشف غير المتسق. يمكن أن تساهم الحواتم المشابهة للهدف في الكشف عن نطاقات غير محددة.تعتمد حساسية الكشف على وفرة حاتمة واحدة والتعرض لها. قد يؤدي انحراف خط الخلية إلى تغييرات طفيفة وطويلة الأمد في الجسم المضاد.متخصص جدا ومعتمد على الحاتمة. وقت تطوير أطول. قد تحتاج إلى مزيد من التحسين مقدمًا. عادة سعر أعلى.

تعمل الأجسام المضادة متعددة النسيلة وحيدة النسيلة والمترابطة بشكل جيد في النشاف الغربي. الأجسام المضادة متعددة النسيلة هي مجموعة من العديد من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة ، والتي يمكن أن تختلف من التحصين إلى التحصين والكمية. تتعرف الأجسام المضادة متعددة النسيلة على حواتم متعددة لمولد ضد ، وبالتالي فهي عادة أكثر حساسية من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة التي تتعرف على حاتمة واحدة فقط. يمكن أن يكون هذا مفيدًا عندما تكون وفرة الحاتمة أو إخفاء الحاتمة أو التعرض للحلقة مصدر قلق. تعد الأجسام المضادة متعددة النكلونات أقل تكلفة وأقل استهلاكا للوقت لإنتاجها. يتم تقييم الأجسام المضادة وحيدة النسيلة لاتساقها كثيرًا وفي كثير من الحالات ، توصيفها الشامل وتاريخ النشر. عادة ما يتم إنتاج الأجسام المضادة وحيدة النسيلة عن طريق سلالات خلوية تولد استنساخًا فرديًا للأجسام المضادة. تنمو خطوط الخلايا هذه (أو الأورام الهجينة) في زراعة الخلايا عندما يكون الجسم المضاد ضروريًا للإنتاج. تمامًا مثل أي خط خلوي متكرر الانتشار ، يمكن أن تخضع خطوط الخلايا هذه لتغييرات تدريجية تؤثر على إنتاجية إنتاج الجسم المضاد أو حتى خصائص الجسم المضاد. تعد الأجسام المضادة المؤتلفة هي الخيار الأفضل لإنتاج أجسام مضادة متسقة وخالية من أصل حيواني واتساق دفعة إلى دفعة. يتم إنتاج الأجسام المضادة المؤتلفة عن طريق نقل خطوط خلايا الإنتاج مع الحمض النووي المؤتلف الذي يشفر الجلوبولينات المناعية المرغوبة. تتمتع الأجسام المضادة المؤتلفة بالعديد من الفوائد: يمكن تعديلها في مواقع محددة لإضافة الخصائص المرغوبة إلى IgGs ولا تخضع لانجراف خط الخلية مثل الورم الهجين وحيدة النسيلة. يمكن تجميع الأجسام المضادة المؤتلفة لتكوين تجمعات من الأجسام المضادة المؤتلفة ، مثل الأجسام المضادة الأولية متعددة النسيلة المؤتلفة أو الأجسام المضادة الثانوية المؤتلفة فائقة التوليف.

عادةً ما يتم توفير الأجسام المضادة منقاة في PBS أو محاليل مماثلة ولكن في بعض الحالات ، تكون مستحضرات الجسم المضاد الخام مثل المصل أو سائل الاستسقاء ضرورية للحفاظ على خصائص معينة للأجسام المضادة أو ناتج الجسم المضاد. من المهم تحسين بروتوكولات النشاف الغربي لتقليل تأثير الشوائب الموجودة في مستحضرات الجسم المضاد الخام على الخلفية.

الكشف المباشر مقابل الكشف غير المباشر

يمكن استخدام كل من طرق الكشف المباشرة وغير المباشرة في النشاف الغربي. توفر كل طريقة مزاياها وعيوبها. باستخدام طريقة الكشف المباشر ، يتم استخدام جسم مضاد أولي مترافق بالإنزيم أو الفلوروفور للكشف عن المستضد محل الاهتمام على اللطخة. في طريقة الكشف غير المباشر ، يتم أولاً استخدام جسم مضاد أولي غير مسمى للارتباط بمولد الضد. بعد ذلك ، يتم اكتشاف الجسم المضاد الأولي باستخدام إنزيم أو جسم مضاد ثانوي مترافق مع فلوروفور. توفر الطريقة غير المباشرة العديد من المزايا مقارنة بالطريقة المباشرة الموضحة أدناه.

  • يتطلب جسمًا مضادًا واحدًا فقط
  • يوفر الوقت عن طريق القضاء على خطوة حضانة الأجسام المضادة الثانوية
  • يزيل الخلفية المحتملة عن طريق التفاعل التبادلي للأجسام المضادة الثانوية في عينات معينة.
  • تضخيم الإشارة ، نظرًا لأن العديد من الثواني ذات العلامات ترتبط بكل أساسي
  • العديد من الخيارات باستخدام الأجسام المضادة الثانوية المسمى HRP أو Alexa Fluor أو Alexa Fluor Plus
  • توفير الوقت مع الكشف المتعدد باستخدام الأجسام المضادة الثانوية الفلورية
  • مزيد من تضخيم الإشارة ممكن مع ثانويين بيوتينيلاتيد والفلوريسنت أو الإنزيم المسمى الستربتافيدين.
  • قد يتداخل الملصق مع الارتباط المستهدف ، مما يؤدي إلى انخفاض الحساسية وخلفية أعلى.
  • اختيار الأجسام المضادة الأولية المقترنة مباشرة محدود
  • مطلوب خطوات إضافية
  • إمكانية الربط غير المحدد والتي قد تزيد من الخلفية في عينات معينة.

اعتبارات الأنواع المضيفة

تُستخدم أنواع متعددة لتكوين أجسام مضادة يمكن استخدامها في تطبيقات اللطخة الغربية. الأكثر شيوعًا: الفأر والأرانب والجرذان والماعز والحمار والدجاج. سيعتمد اختيار الجسم المضاد الأساسي للأنواع المضيفة على ما إذا كان يتم فحص هدف واحد أو يتم فحص أهداف متعددة في تجربة لطخة غربية متعددة الإرسال. عند فحص مستضد واحد فقط في كل مرة ، يمكن نظريًا استخدام أي نوع مضيف ، ومع ذلك يتم إنتاج معظم الأجسام المضادة البحثية الأولية للنشاف الغربي من الأرانب المحصنة (متعددة النسيلة ، وحيدة النسيلة ، المؤتلفة) أو الفئران (الورم الهجين المشتق وحيدة النسيلة). توفر بعض الأنواع المضيفة مزايا إضافية على الأنواع الأخرى على سبيل المثال بسبب حجمها أو بيولوجيا المناعة. عند مقارنة الفأر أو الأرانب على سبيل المثال ، عادة ما تكون الأرانب أفضل في تحمل التحصينات ولديها عمر أطول بكثير من الفئران. علاوة على ذلك ، تُظهر الأرانب ذخيرة طبيعية أكثر تنوعًا من الأجسام المضادة مقارنة بالفئران ، مما يجعل الأرانب مضيفًا شائعًا لتوليد الأجسام المضادة متعددة النسيلة وحيدة النسيلة والأرانب المؤتلفة. عندما تهدف إلى إنتاج أنسب الأجسام المضادة أحادية النسيلة أو المؤتلفة من أجل النشاف الغربي ، فإن الذخيرة الأكبر من الأجسام المضادة المنتجة في الأرانب تسمح بفحص وعزل واستنساخ أكثر نجاحًا للأجسام المضادة المؤتلفة عالية التقارب. هذا مهم بشكل خاص عند محاولة صنع أجسام مضادة لطخة غربية إلى حواتم أكثر تحديًا والتي قد لا يكون من الممكن إنتاجها مع أنظمة أخرى.

عند إجراء لطخة غربية متعددة الإرسال ، استخدم الأجسام المضادة الأولية من أنواع مضيفة مختلفة لكل هدف يتم فحصه. من الناحية المثالية ، استخدم مزيجًا من الأجسام المضادة من نوعين مرتبطين بعيدًا مثل الفئران والأرانب ، وتجنب التركيبات مثل الفئران والجرذان أو الماعز والأغنام. سيساعد هذا في اختيار الأجسام المضادة الثانوية المناسبة لتقليل التفاعل التبادلي المحتمل للأجسام المضادة ، مما قد يؤدي إلى نتائج مربكة.

مضاعفة اعتبارات المضيف

الأنواع المضيفة الأولى للجسم المضادالأنواع المضيفة الثانوية
جرذأرنب
الفأرأرنب
ماعزأرنب أو فأر
الفأرجرذX
ماعزخروفX

لطخة غربية الأجسام المضادة

على الرغم من أن الأجسام المضادة مصممة للتعرف على مستضد مستهدف محدد ، إلا أنها قد لا تعمل بشكل متساوٍ في جميع التطبيقات. اختر الأجسام المضادة المصممة خصيصًا للنشاف الغربي أو التي تسرد النشاف الغربي كتطبيق. بالإضافة إلى ذلك ، من المهم التأكد من أن الجسم المضاد خاص بالبروتين الأصلي أو البروتين المشوه ، لتحديد ما إذا كان يجب إجراء SDS-PAGE أو PAGE الأصلي.

عند اختيار الجسم المضاد الأساسي ، تأكد من:

  1. تم التحقق من صحة الجسم المضاد للنشاف الغربي
  2. خصوصية الجسم المضاد تجاه البروتين الأصلي أو المشوه

تخضع الأجسام المضادة لـ Invitrogen لمقاربة اختبار صارمة مكونة من جزأين. الجزء 1: التحقق من خصوصية الهدف ، الجزء 2: التحقق الوظيفي من التطبيق. يساعد التحقق من النوعية المستهدفة على ضمان ارتباط الجسم المضاد بالهدف الصحيح. تم تطوير معظم الأجسام المضادة مع وضع تطبيقات محددة في الاعتبار. اختبار أن الجسم المضاد يولد نتائج مقبولة في تطبيق معين هو الجزء الثاني من تأكيد أداء الجسم المضاد. تعرف على المزيد حول عملية التحقق من صحة الجسم المضاد Invitrogen.


لا تحتاج اختبارات الأجسام المضادة & # x27t للكشف عن تكوينات متعددة من الأجسام المضادة؟

أنا & # x27 م تحت انطباع أن العديد من الأجسام المضادة ذات هياكل موقع الارتباط المختلفة يمكن أن يصنعها أشخاص مختلفون لنفس العامل الممرض. كل قطعة من الأدبيات التي قرأتها تشير إلى & quotthe الجسم المضاد & quot عن عامل ممرض معين مثله & # x27s نوعًا من الشيء الأحادي المفرد ، حيث أعتقد في الواقع أن الأجسام المضادة لممرض معين هي في الواقع أشياء تعددية بدرجة معينة من التباين؟ لا يوجد & quot؛ جسم مضاد & quot؛ & quot؛ لا يوجد & quot؛ جسم مضاد & quot لـ SARS-CoV-2.

على سبيل المثال ، يمكن أن يحتوي SARS-CoV-2 على عدة مناطق فريدة في هياكل البروتين الخاصة به حيث يمكن تكوين العديد من الأجسام المضادة المختلفة ، لذلك يمكن أن يكون لدى المريض الذي تم شفاؤه أجسامًا مضادة مختلفة قليلاً مقارنةً بمريض آخر تم شفاؤه ، لكن كلا من الأجسام المضادة الخاصة بهما سيظلان مرتبطين بأشكال مختلفة. مناطق فريدة من SARS-CoV-2.

حتى أن هناك شركات اختزلت العديد من الأجسام المضادة المرشحة إلى عدد قليل يتمتع بقدرات تحييد عالية بشكل خاص ضد SARS-COV-2 ، والنقطة هي أن العديد من الأجسام المضادة المختلفة يمكن أن ترتبط بعامل مرض واحد.

لذلك عندما يتحدث الناس عن & quot؛ اختبار الجسم المقتصر & quot؛ & quot؛ ما الذي يتحدثون عنه ، & quot؛ بالضبط؟

هل يكشف الاختبار بالفعل عن وجود مضاعف أجسام مضادة مختلفة ، وكلها أظهرت تأثيرات ملزمة للفيروس؟

أو لا تكتشف الاختبارات سوى تكوين واحد محدد من الجسم المضاد ، ويمكن أن تفوت تكوينات الأجسام المضادة الأخرى ، مما يؤدي إلى نتيجة سلبية خاطئة (كان المريض قد أصيب بالفعل وأنتج أجسامًا مضادة ، وليس فقط تلك التي تم تحديدها للاختبار).

ربما يعتمد الأمر قليلاً على كيفية إجراء الاختبار. أعتقد أن معظم الاختبارات ستحتوي على بروتين فيروسي ثابت ، وستكتشف الأجسام المضادة المرتبطة بهذا البروتين. لن يتم اكتشاف أي أجسام مضادة تربط بروتينًا مختلفًا ، أو حاتمة على البروتين لا يمكن الوصول إليها بسبب كيفية تجميدها. لكن الاختبارات عادةً ما تعطي قراءة ثنائية فقط ، لذلك إذا ارتبطت أي أجسام مضادة ، فستكون إيجابية.

أنت محق في أن استجابة الجسم المضاد تتضمن العديد من الأجسام المضادة المختلفة. من غير المحتمل أن لا يمتلك الشخص الذي لديه أجسام مضادة ضد الفيروس أيًا منها يربط البروتين الذي يستخدمه لإجراء الاختبار. على افتراض أن الاختبار تم بشكل جيد.

أنت محق تمامًا في أنه بشكل عام ، يمكن أن تختلف الأجسام المضادة التي ينتجها شخص ما عن الأجسام المضادة التي ينتجها شخص آخر. هذا ، من حيث المبدأ ، قد يجعل من الصعب للغاية التمييز بين أجسام مضادة معينة ومرض ما.

لحسن الحظ ، عندما نجري اختبارات الأجسام المضادة ، فإننا لا نختبر وجود شكل معين من الأجسام المضادة. لا نحتاج إلى تحديد بنية البروتين المحددة للأجسام المضادة لفيروس كورونا. نحتاج فقط إلى معرفة ما إذا كانوا موجودين أم لا. ونقوم بذلك عن طريق أخذ عينة من المصل ، والتي قد تتضمن أو لا تحتوي على أجسام مضادة لمرض معين ، وتعريضها لعينة من مستضد من المرض المعني. في حالة وجود أجسام مضادة لهذا المرض ، يحدث تفاعل مرئي لأن الأجسام المضادة تميل إلى ربط العديد من المستضدات ويحدث التكتل المرئي لمجمعات المستضد والأجسام المضادة.

لذلك لا يهم موقع الارتباط المعين الذي يتعرف عليه الجسم المضاد. من المهم فقط أن يتعرف الجسم المضاد على المستضد.

الآن ، اختيار المستضد هو في حد ذاته مشكلة فنية. تنفث معظم الخلايا في جسم الإنسان باستمرار على سطحها قطعًا صغيرة من البروتينات التي تصنعها على وجه التحديد حتى يتمكن الجهاز المناعي من النظر إلى تلك القطع والتفاعل إذا اكتشف شيئًا خاطئًا. تلك القطع نفسها هي المستضدات. نظرًا لأن هذه القطع هي نفسها مجموعات فرعية من الفيروس ، فإن أسهل طريقة للتأكد من أن المستضد الخاص بك سوف يحفز جميع الأجسام المضادة هو استخدام فيروس كامل. ولكن ، لأسباب واضحة ، فإن طلب فيروس نشط لاستخدامه في الاختبارات التشخيصية أقل من المثالي. بشكل عام ، تستخدم اختبارات الأجسام المضادة جزءًا من البروتين الفيروسي. ولكن من المهم التأكد من أن هذا البروتين فريد من نوعه بالنسبة للفيروس الذي تحاول اختباره ، أو قد ترى تفاعلات من الأجسام المضادة التي لا تخص الفيروس الخاص بك. يستخدم اختبار الأجسام المضادة لـ CDC تسلسلًا من بروتين سبايك.


بيولوجيا الماعز

بسبب هذه الحواتم المتعددة ، يمكن أن يرتبط أكثر من نوع واحد من الأجسام المضادة بمستضد مطابق ، ولأن الأجسام المضادة لها ذراعين ، يمكن لجسم مضاد واحد أحيانًا الارتباط بمولدين ضد مستضدين. إذا كانت كمية المستضد إلى الجسم المضاد في حالة توازن ، فيمكن تكوين مجمعات كبيرة من المستضد / الأجسام المضادة. هذا يتسبب في تعجيل المركب.

في اختبار AGID ، يتم تحضير قرص أجار (الذي يشبه نوعًا ما مثل جيلو صلب) في طبق بتري. تُثقب الثقوب ويوضع المستضد في ثقب ويوضع محلول الجسم المضاد في فتحة أخرى. سوف تنتشر الحلول من الثقوب في أجار. عندما يلتقي المستضد سيحدث الارتباط بالأجسام المضادة. في المنطقة التي يوجد فيها المستوى المناسب من الجسم المضاد للمستضد ، يتشكل خط أبيض رفيع يكون مرئيًا للعين المجردة.

تعتبر اختبارات AGID دقيقة للغاية فيما يتعلق بالارتباط المحدد ، وبالتالي فإن الإيجابيات الخاطئة نادرة ، لكن الاختبار لا يكتشف المستويات المنخفضة من الأجسام المضادة. ينتج عن هذا نتائج سلبية كاذبة عندما يكون موضوع الاختبار في المراحل المبكرة من الإصابة ولديه مستوى منخفض من الأجسام المضادة.


متعدد النسيلة مقابل وحيدة النسيلة

غالبًا ما تُصنف الأجسام المضادة في المختبر على أنها متعددة النسيلة أو أحادية النسيلة. الأجسام المضادة متعددة النسيلة هي مجموعة غير متجانسة من الأجسام المضادة التي تتعرف على مناطق متعددة (تسمى حواتم) من نفس المستضد. غالبًا ما تعطي هذه الأجسام المضادة استجابة أكثر قوة ولكن من المرجح أن تتفاعل مع بروتينات مماثلة.

يشير monoclonal إلى حقيقة أن الأجسام المضادة يتم إنتاجها من استنساخ واحد والتعرف على نفس حاتمة المستضد بالضبط. عادةً ما تكون هذه الجزيئات محددة جدًا ، ولكنها أكثر حساسية لفقدان الحاتمة من خلال تعديل المستضد.

تعد قدرة الأجسام المضادة على التعرف على بروتينات معينة مفيدة في العديد من الإجراءات المختبرية المختلفة مثل التجلط المناعي (البقع الغربية) و FACS والكيمياء المناعية (IHC) و ELISAs. بشكل عام ، تستخدم هذه الإجراءات نوعين من الأجسام المضادة: الأولي ، الذي يتعرف على البروتين المعني ، والجسم المضاد الثانوي ، وهو خاص بالأجسام المضادة من الكائن الحي الذي ينتج الجسم المضاد الأولي. عادة ما يرتبط الجسم المضاد الثانوي إما بمادة كيميائية أو إنزيم لتضخيم الإشارة الناتجة.


موقع الجمع بين المستضد

  • ثلاثة في السلسلة الثقيلة و
  • ثلاثة في السلسلة الخفيفة
  • من هياكل الأجسام المضادة
  • للنظام الجيني الذي يولد الأجسام المضادة مع العديد من CDRs المختلفة.
  • البنية الثلاثية لذراع جسم مضاد خاص بالليزوزيم الموجود في بياض بيضة الدجاج (أعلى اليمين) المرتبط بـ
  • الليزوزيم (أسفل اليسار).
  • المنطقة الثابتة من السلسلة الخفيفة (Cإل ) وأول منطقة ثابتة من السلسلة الثقيلة (Cح )
  • مناطق متغيرة من الثقيل (V.ح ) وسلاسل الضوء (V.إل )
  • المنطقة الثالثة شديدة التغير من السلاسل الثقيلة (Hv3H) والخفيفة (Hv3L). تعتبر أهمية زوج من المناطق المحددة ذات المتغير الفائق أو التكميلية في ربط الحاتمة نموذجية لكل من الأجسام المضادة ومستقبلات الخلايا التائية للمستضد. وهذا أمر منطقي لأن فرص التنوع الجيني في تلك المواقع أكبر بكثير مما هي عليه في سجلات الإنجاز الموحدة الأولى والثانية. [وصلة]
  • Gln121 هو الجلوتامين الذي هو السمة الغالبة للحاتمة على الليزوزيم.

الصورة الثانية (مقدمة أيضًا من الدكتور أميت) هي نموذج يملأ الفراغ لنفس الجسم المضاد مع السلسلة الخفيفة باللون الأصفر ، والسلسلة الثقيلة باللون الأزرق. ينظر المنظر لأسفل على سطح ربط الحاتمة (يسار) والحلقة على الليزوزيم (يمين). في مركب الجسم المضاد-المستضد ، يتلاءم السطحان معًا بإحكام. تم ترقيم بقايا الأحماض الأمينية الـ 17 التي تلامس الليزوزيم في مركب الجسم المضاد (1 & ndash7 على السلسلة L ، 8 & ndash17 على السلسلة H. رقم 14 هو Gln-121.

ال الخضوع ل يسمى ارتباط الجسم المضاد بمولد الضد الخاص به التقارب. تمت مناقشة التقارب في صفحة منفصلة. اربط به.


الأجسام المضادة متعددة النسيلة مقابل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة

ما هو الجسم المضاد متعدد النسيلة؟
يمثل الجسم المضاد Polyclonal مجموعة من الأجسام المضادة من خلايا B مختلفة تتعرف على حواتم متعددة على نفس المستضد. يتعرف كل من هذه الأجسام المضادة الفردية على حاتمة فريدة موجودة على هذا المستضد.

  • غير مكلفة لإنتاج.
  • سريع الإنتاج. جسم مضاد منقى جاهز للاستخدام في أقل من أربعة أشهر.
  • سهل التخزين.
  • مستقر للغاية ومتسامح مع تغيرات الأس الهيدروجيني أو المخزن المؤقت.
  • تقارب إجمالي أعلى للأجسام المضادة ضد المستضد بسبب التعرف على حواتم متعددة.
  • بشكل عام ، توفر القدرة على اكتشاف الحواتم المتعددة اكتشافًا أكثر قوة.
  • يوفر حساسية أكبر للكشف عن البروتينات الموجودة بكميات منخفضة في العينة لأن العديد من الأجسام المضادة سترتبط بحلقات متعددة على البروتين.
  • مثالي كجسم مضاد للالتقاط في ساندويتش إليسا. قدرة أكبر على التقاط البروتين المستهدف بسرعة.
  • يؤدي التقارب الفائق للأجسام المضادة عمومًا إلى ارتباط أسرع بمولد الضد المستهدف. مثالي في المقايسات التي تتطلب التقاط سريع للبروتين مثل IP أو ChIP.
  • أكثر قوة بشكل ملحوظ عند فحص البروتينات التي تظهر اختلافات طفيفة في الحاتمات الفردية مثل التمسخ أو تعدد الأشكال أو التغييرات التوافقية.
  • متفوقة للاستخدام في الكشف عن البروتين الأصلي في أنواع الفحص المتعددة.
  • أسهل بكثير في الاقتران بملصقات الأجسام المضادة. أقل احتمالا للتأثير على قدرة الربط.
  • التباين بين الدُفعات المختلفة المنتجة في حيوانات مختلفة في أوقات مختلفة
  • احتمالية أعلى للتفاعل المتبادل بسبب التعرف على الحواتم المتعددة
  • عادة ما تكون تنقية تقارب المصل مطلوبة لتقليل التفاعل المتبادل

ما هو الجسم المضاد وحيدة النسيلة؟
على النقيض من ذلك ، يمثل الجسم المضاد أحادي النسيلة الجسم المضاد من جسم مضاد منفرد ينتج خلية B وبالتالي يرتبط فقط بحلقة واحدة فريدة. كل جسم مضاد فردي في خليط متعدد النسيلة هو تقنيًا جسم مضاد أحادي النسيلة ومع ذلك ، يشير هذا المصطلح عمومًا إلى عملية يتم من خلالها عزل الخلية B الفعلية ودمجها في خط خلية الورم الهجين الخالد بحيث يمكن تكوين كميات كبيرة من الجسم المضاد المتطابق.

  • يمكن أن تنتج كميات كبيرة من الجسم المضاد المتطابق. دفعة تجانس دفعة.
  • خصوصية عالية لحلقة واحدة. انخفاض احتمال التفاعل المتبادل.
  • يمكن أن توفر نتائج أفضل في المقايسات التي تتطلب قياس مستويات البروتين.
  • إنتاج أكثر تكلفة بكثير.
  • يتطلب وقتًا أطول بكثير لإنتاج وتطوير الاستنساخ المهجن.
  • غالبًا ما تجعل التغييرات الصغيرة في بنية الحاتمة الجسم المضاد وحيد النسيلة غير قادر على اكتشاف البروتين المستهدف.
  • شروط تخزين أكثر تطلبًا للنسخ.
  • ثقافة الخلية وقدرات التنقية المطلوبة.
  • أقل قوة لاكتشاف البروتين في حالة تغيير طبيعة أو تشكل متغير.
  • أقل مثالية للتطبيق الذي يتطلب الالتقاط السريع للبروتين المستهدف.
  • أكثر حساسية لظروف الأس الهيدروجيني والعازل.
  • أكثر عرضة للتغييرات الملزمة عند التسمية.
  • لتعويض العديد من هذه العيوب ، من الضروري إنتاج مجموعة من العديد من الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. هذا عادة ما يكون باهظ التكلفة والوقت.

ملخص:
بالنسبة للتطبيقات مثل التصنيع التشخيصي وتطوير الأدوية العلاجية التي تتطلب كميات كبيرة من الأجسام المضادة المتطابقة الخاصة بحلقة واحدة ، يمكن أن تكون الأجسام المضادة أحادية النسيلة حلاً مثاليًا. بالنسبة للتطبيقات البحثية العامة ، فإن مزايا الأجسام المضادة متعددة النسيلة تفوق عادةً المزايا القليلة التي توفرها الأجسام المضادة وحيدة النسيلة. مع تنقية تقارب المصل ضد أهداف مستضد صغيرة ، يتم توسيع مزايا الأجسام المضادة متعددة النسيلة بشكل أكبر. تقدم الأجسام المضادة أحادية النوعية ، التي تمت مناقشتها في القسم التالي ، ما نشعر أنه الأفضل في كلا العالمين من خلال الجمع بين النوعية العالية للأجسام المضادة والتكلفة المنخفضة والإنتاج السريع.


تعريف

يشير المستضد إلى مادة سامة أو مادة غريبة أخرى تحفز استجابة مناعية في الجسم ، وخاصة إنتاج الأجسام المضادة ، بينما يشير المستضد إلى جزيء صغير ، عند دمجه مع ناقل أكبر مثل البروتين ، يمكن أن يثير الإنتاج من الأجسام المضادة التي ترتبط به على وجه التحديد (في الحالة الحرة أو مجتمعة). يشرح هذان التعريفان الفرق الأساسي بين مستضد و hapten.

مستضدات كاملة أو غير كاملة

المستضدات عبارة عن جزيئات كاملة في حين أن haptens عبارة عن مستضدات غير كاملة. ومن ثم ، يعد هذا فرقًا كبيرًا بين مستضد و hapten.

ملزمة لمجمع MHC

Furthemore ، تساهم القدرة على الارتباط بمركب MHC في الاختلاف بين مستضد و hapten. هذا هو أن المستضدات يمكن أن ترتبط بمركب MHC بينما لا يمكن لـ haptens الارتباط بمركب MHC.

ملزمة للأجسام المضادة

هناك اختلاف آخر بين مستضد و hapten وهو أن المستضدات يمكن أن ترتبط مباشرة بالأجسام المضادة بينما لا يمكن لل haptens الارتباط مباشرة بالأجسام المضادة.

استجابة مناعية

بالإضافة إلى ذلك ، هناك اختلاف مهم بين المستضد والناشئ هو أن المستضدات يمكن أن تؤدي إلى استجابة مناعية من تلقاء نفسها بينما لا يمكن أن تؤدي الهابتينات إلى استجابة مناعية من تلقاء نفسها.

استنتاج

باختصار ، المستضدات عبارة عن جزيئات يمكنها إثارة استجابة مناعية من تلقاء نفسها ، بينما يحتاج haptens إلى الارتباط بجزيء ناقل ليصبح مستضدًا كاملًا ، مما يؤدي إلى استجابة مناعية. يعمل كل من المستضد وحامل الناقل كمواد مناعية. وبالتالي ، فإن الاختلاف الرئيسي بين مستضد و hapten هو القدرة على استنباط استجابة مناعية بشكل مستقل.

المرجعي:

1. "مستضدات". التجويف | علم التشريح ووظائف الأعضاء بلا حدودمتوفر هنا

الصورة مجاملة:

1. & # 8220Antibody & # 8221 بواسطة Fvasconcellos 19:03 ، 6 مايو 2007 (UTC) & # 8211 نسخة ملونة من الصورة: Antibody.png ، في الأصل عمل من حكومة الولايات المتحدة (المجال العام) عبر ويكيميديا ​​كومنز
2. & # 8220Hapten & # 8221 بواسطة MantOs & # 8211 العمل الخاص (CC BY-SA 3.0) عبر Commons Wikimedia

نبذة عن الكاتب: لاكنه

لاكنا ، خريجة البيولوجيا الجزيئية والكيمياء الحيوية ، هي عالمة أحياء جزيئية ولديها اهتمام واسع وحاد باكتشاف الأشياء ذات الصلة بالطبيعة


شاهد الفيديو: فحص الأجسام المضادة يحدد إن كان الشخص قد أصيب بكورونا (قد 2022).


تعليقات:

  1. Cynyr

    الجواب المختصة بطريقة مغرية ...

  2. Perrin

    يمكنني أن أقترح زيارتك لك موقعًا ، مع معلومات كبيرة حول موضوع مثير للاهتمام.

  3. Osborn

    أعتقد أنك لست على حق. أنا متأكد. أدعوك للمناقشة. اكتب في رئيس الوزراء ، سوف نتواصل.

  4. Nu'man

    أهنئ ، ما هي الكلمات ... ، فكرة رائعة



اكتب رسالة